精密吸取1.2中的高效混合对照品溶液1、2、液相5、色谱时测10、法同15、定鱼20μL，腥草按1.4色谱条件分别进样测定，芩蓝以待测化合物的合剂质量浓度（x）为横坐标，色谱峰面积（y）为纵坐标进行线性回归，中种计算线性方程和相关系数。成分
将1.2中的高效混合对照品溶液用50%甲醇溶液逐级稀释，在1.4色谱条件下测定，液相以3倍信噪比对应的色谱时测质量浓度作为检出限，以10倍信噪比对应的法同质量浓度作为定量限。7种待测成分的定鱼线性范围、线性方程、相关系数、检出限及定量限见表1。
由表1可知，7种待测化合物在各自的质量浓度范围内与色谱峰面积线性关系良好，相关系数均大于0.999，方法的检出限和定量限均满足鱼腥草芩蓝合剂中7种化合物的检测需要。
取鱼腥草芩蓝合剂样品，按照1.3样品处理方法制备样品溶液，分别在配制完成后第1、2、4、8、12、24h进样，测定各待测化合物的色谱峰面积。绿原酸、连翘酯苷A、黄芩苷、槲皮苷、汉黄芩苷、槲皮素和汉黄芩素色谱峰面积测定结果的相对标准偏差分别为1.78%、0.81%、0.74%、0.93%、1.21%、1.01%、1.22%，表明样品溶液在24h内稳定性良好。
取鱼腥草芩蓝合剂样品，按1.3方法平行制备6份样品溶液，在1.4色谱条件下分别进样测定，计算绿原酸、连翘酯苷A、黄芩苷、槲皮苷、汉黄芩苷、槲皮素和汉黄芩素的质量浓度，结果见表2。
由表2可知，绿原酸、连翘酯苷A、黄芩苷、槲皮苷、汉黄芩苷、槲皮素和汉黄芩素测定结果的相对标准偏差为1.23%～1.76%，表明该方法精密度较好，满足测定要求。
精密量取6份鱼腥草芩蓝合剂样品各1mL，分别精密加入绿原酸、连翘酯苷A、黄芩苷、槲皮苷、汉黄芩苷、槲皮素和汉黄芩素单标储备液各1.0、1.0、2.0、0.2、5.0、0.2、0.5mL，按照1.3样品处理方法制备加标样品溶液，在1.4色谱条件下分别进样测定，计算样品加样回收率，结果见表3。
由表3可知，样品加标平均回收率为在98.17%～101.48%，表明该方法准确性良好。
建立了高效液相色谱法同时测定鱼腥草芩蓝合剂中绿原酸、连翘酯苷A、黄芩苷、槲皮苷、汉黄芩苷、槲皮素和汉黄芩素含量的方法。所测7种成分涉及4种药材中的活性成分，涵盖了多类指标成分，包括2种苯丙素和5种黄酮，为鱼腥草芩蓝合剂的质量控制提供了参考方法。
相关链接：绿原酸，连翘酯苷A，汉黄芩苷，汉黄芩素
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